Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型癌症患者进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次消失家兔自身免疫催化到消失1改型白血病外科病症的困难重重率在儿童时期就有很好的叙述，多个家兔自身免疫催化里面性的儿童里面有70%在血清叠加后10年内患上白血病，而随访15年的儿童这一数量上升到84%。相比之下，占外科1改型白血病一半以上的改型1改型白血病的发病组成员态还没想得到充分的研究工作。

日渐多的人开始用于依此种系统来定义1改型白血病的困难重重：生物体在消失多种家兔自身免疫催化时转到第1先决条件，消失血糖异常时转到第2先决条件，消失病症时转到第3先决条件。一些多发家兔自身免疫催化里面性的生物体，在1期和2期，困难重重较很慢，并发展为发病的1改型白血病。我们以前叙述了一组成员在首次侦测到多种家兔自身免疫催化检验后大概10年无白血病的亦然很慢困难重重者，这组成员病征人数少，但构造非常明确。随后，我们发现家兔自身蛋白质免疫催化CD8+T肝细胞催化在困难重重减很慢的病征里面基本不发挥作用，但在全面性发病和值得注意的白血病病征里面很容易侦测到。这显然指显现出，与困难重重病征相比，这些病征自身免疫催化的诱发增强。

最初研究工作指显现出，尽管诱发性T肝细胞(Treg)数量正常，但白血病病征发挥作用一些功能缺失，其里面有数对IL-2的催化能力上升。此外，白血病病征里面的振荡CD4+T肝细胞显然对诱发兼具抵抗性，乏善可陈为振荡T肝细胞的诱发弱化，纯净产生的Treg和肾脏产生的正向Treg，以及蛋白质经历的CD4+T肝细胞里面IL-2催化弱化。本研究工作的目标是叙述了CD4+诱发性T肝细胞(Treg)在一小群亦然减很慢困难重重者里面的构造，他们的岁数为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

法则：BOX研究工作是一项以许多人为基础的主干研究工作，在21岁表列出发病的病征亲属里面检查1改型白血病的可怕各种因素。我们以前叙述了长期减很慢困难重重者的构造，他们保持多重家兔自身免疫催化里面性超过10年，但没消失白血病的外科病症，很慢性或非进行时性自身免疫。随后，10名之后保持无白血病并不愿备有大量血清检验的减很慢困难重重者纳入T和B肝细胞功能系统性。在目前的研究工作里面，8名很慢困难重重者(SP组成员)，里面位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁间的家兔自身免疫催化里面性。所有的大多数人都属于1改型白血病困难重重的1期，尽管一些人随后失去了家兔自身免疫催化对某些蛋白质的里面性催化，然而，一名病征已经属于2期大概6年，但没消失外科病症，一名病征被诊断为白血病，该受试者72岁，在采自实验检验时，其HbA1c增大到53 mmol/mol(7%)，在数据系统性里面对该NADP进行时了基本上系统性报告。分离外周血单个核肝细胞(PBMCs)，有别于多参数流式肝细胞练成和T肝细胞诱发试验系统性报告NADP里面Treg的kHz、表改型和功能。用于FlowSOM和CITRUS(聚类鉴定、总括和回归)进行时无监督聚类系统性，系统性报告Treg表改型。

结果：与有益NADP相比，来自很慢困难重重体的知觉CD4+T肝细胞的监督聚类辨识，酪氨酸的知觉CD4+ TregkHz上升，与抗生素正向的TNFR相关蛋白(GITR)表示上升有关。一名HbA1c增大的病征与困难重重减很慢者和反之亦然的小鼠相比，Treg曲谱有所各有不同。功能系统性指显现出，与有益NADP相比，来自减很慢困难重重体的Treg介导的CD4+振荡T肝细胞诱发明显损伤。乏善可陈为对振荡CD4+T肝细胞CD25和CD134表示的诱发上升。

由此可知1 集中的表改型系统性辨识，CD4+Treg亚改型在很慢困难重重字段里面上升。由FlowSOM转化的Treg二楼，周围在来自所有NADP的已逝CD4+CD45RA -肝细胞上。根据标有物表示鉴定显现出10个元簇:知觉T肝细胞_1;知觉T cell_2;知觉T cell_3;知觉T cell_4;CD49b知觉T肝细胞;HLA-DR + GITR +知觉T肝细胞;CPUTreg_1;CPUTreg_2;CPUTreg_3;和CPUTreg_4。(a)用于9个各有不同Treg标有转化的10个元簇的MST。每个节点代表人一个一个大(100个一个大)，更大的元一个大(10个元一个大)在节点组成员周围上色。每个节点里面的饼由此可知对此单个标有的表示级别。(b)每个元聚类的热由此可知，以辨识总体标有表示。(c, d)为HD组成员(c)和SP组成员(d)转化由此可知，以及FlowSOM辨识的每个元簇的孔洞。(e-l)相比较原叔父量为每个metacluster盒线由此可知(原叔父量> 0.05%)确定为HD和SP组成员:CPUTreg_2 (e),CPUTreg_3 (f),CPUTreg_4 (g), HLA-DR + GITR +知觉T肝细胞(h)、知觉T cell_1(i),知觉T cell_2 (j),知觉T cell_3 (k) n d CD49b知觉T肝细胞(l)。橙色红色代表人人口为120人SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检验。此键适用于由此可知形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

由此可知2 用于CITRUS的预测模改型猜测，TregkHz的上升是困难重重减很慢的图标。分级暂时性(a - f)和柑橘系统性(g-k)更为SP大多数人和反之亦然的HD大多数人在CD4+CD45RA−T肝细胞上的差异。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l社群的代表人性由此可知。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR表示进行时分离，模拟FlowSOM社群。(b) HD(网纹)和SP(黑纹)组成员以及NADPSP 606(橙色)里面CD25+ cd127的kHz概述由此可知。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+暂时性叔父集的盒线由此可知;(c) HLA-DRloGITR−(CPUTreg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(CPUTreg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(CPUTreg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+CPUT cell)。(g - i)柑桔簇折叠由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3表示强度着色，箭头突显现出的簇被辨识为SP和HD字段间的各有不同。(j)盒线由此可知辨识了在SP(黑纹)和HD(灰点)组成员里面，CITRUS知觉Treg_3和Treg_4的相比较原叔父量(数量)。(k)直方由此可知辨识每个簇的表改型(粉红色)和Treg标有相比较表示与氛围表示(深蓝色);上列，CPUTreg_3;后面悄悄，CPUTreg_4。氛围与所有其他簇里面标有的表示有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检验

由此可知3 与有益献血者相比，困难重重减很慢者知觉treg的GITR上升。每个知觉CD4+T肝细胞元簇(知觉T肝细胞_1;知觉T cell_2;知觉T cell_3;CD49b +知觉T肝细胞;HLA-DR + GITR +知觉T肝细胞;CPUTreg_2;CPUTreg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)侦测每个表示标有的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)字段的表示热由此可知(sp606不有数在内)。(c,d)知觉Treg_4元簇里面所有HD(灰色)、所有SP(深蓝色)和SP 606(橙色)的FlowSOM GITR表示串联，辨识直方由此可知(c)和概述由此可知(d)。Wilcoxon配对符号秩和检验，p< 0.07(橙色)所有NADP有数，p< 0.05(深蓝色)NADPSP 606和反之亦然的HD不有数在测试里面。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs里面GITR表示，从分级暂时性，从所有HD(灰色)、所有SP(深蓝色)和SP 606(橙色)串联，辨识直方由此可知(e)和概述由此可知(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对符号秩检验

由此可知4 来自减很慢困难重重的CD4+ treg肝细胞控制振荡CD4+T肝细胞的能力上升。SP组成员用深蓝色的线和红色对此，HD组成员用黄色的线和红色对此，橙色的线/红色对此NADPsp606。用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T肝细胞进行时分选。CD4+CD25−(这样的话者)被标有为CFSE, Treg按观察的数量滴定。用抗CD3 /28微珠正向肝细胞，培养3在此之后进行时流式肝细胞练成侦测。(a-d)与CD4+这样的话者相比较应的treg培养(其会)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD这样的话者培养。(a,b,f) CFSE增生(a,e)和CFSE诱发百分比(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的诱发百分比。用于里面性对照(酪氨酸的响应肝细胞不含treg)量化诱发百分比。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差系统性。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重更为测试

由此可知5 振荡CD4+T肝细胞对减很慢困难重重的T肝细胞正向的诱发更敏感。SP组成员用深蓝色的线和红色对此，HD组成员用黄色的线和红色对此，橙色的线/红色对此NADPsp606。用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T肝细胞进行时分选。CD4+CD25−(这样的话者)被cfsel标有，treg按观察的数量滴定。用抗CD3 /28微珠正向肝细胞，培养3在此之后进行时流式肝细胞练成(CD25反染)和肝细胞因叔父系统性。HD Treg与HD、SP或sp606这样的话者共同培养。(a,b) CFSE增生(a)和CFSE诱发调升(b)。(c,d) CD25诱发调升(c)和CD134诱发调升(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共培养里面的表示。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差系统性。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重更为测试

假设：我们得显现出的假设是，来自减很慢困难重重叔父的正向知觉CD4+Treg在GITR表示里面想得到了扩展和丰富，突显了实质研究工作Treg在1改型白血病风险生物体里面的举例来说的实质。

原文显现记事：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28